小分子代謝物是生物體內(nèi)代謝過程中的產(chǎn)物或中間體,處在調(diào)控過程中的更下游,參與各種生化反應(分子量小于 1 000 Da)。代謝組學研究生物體內(nèi)小分子代謝物的種類和含量變化,這些變化在不同生理、環(huán)境和疾病狀態(tài)下發(fā)生,能反映生物的生化過程、代謝途徑、生理狀態(tài)和疾病信息,從而揭示表型性狀的調(diào)控機制。代謝組學能深層次地展示了各種影響因素對表型性狀的調(diào)節(jié)機制,能反映生物體在遺傳變異或環(huán)境刺激等變化后產(chǎn)生的相應結果,從而更接近生物表型。
靶向代謝組學(Targeted Metabolomics)是一種專注于分析生物樣本中已知代謝物的方法,是以標準品為參照,對特定代謝物進行有針對性地、特異性地檢測與分析,得到絕對定量結果,可以為后續(xù)代謝分子標志物的深入研究和開發(fā)利用提供有力支持。與非靶向代謝組學不同,靶向代謝組學通常關注一組特定的代謝物,這些代謝物可能是基于先前研究、生物學知識或特定的代謝途徑。
通過分析患者體內(nèi)代謝物的譜圖,進行疾病分類、生物標志物的發(fā)現(xiàn)、個性化治療、疾病機理機制研究、藥物開發(fā)和藥物作用機制研究等。
涉及疾病研究(疾病分類、生物標志物、個性化治療、疾病機理機制)、藥效評價、藥物開發(fā)、藥物作用機理等。
研究肉類品質(zhì)、致病機理、生長發(fā)育機制等。
包括抗脅迫研究、植物生長發(fā)育、天然產(chǎn)物研究等。
包括食品儲藏、食品鑒定、加工工藝、功能性食品等。
探索致病機理、耐藥機制、病原體-宿主相互作用等。
關注發(fā)酵過程優(yōu)化、生物燃料生產(chǎn)、環(huán)境危害風險評估等。
研究漁業(yè)資源、海洋養(yǎng)殖、漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等。
支持非靶代謝、非靶脂質(zhì)以及靶向代謝研究
非靶向代謝組學 | 非靶向脂質(zhì)組學 |
膽汁酸(40種) 氨基酸(38種) 短鏈脂肪酸(8種) 長鏈脂肪酸(37種) 類固醇激素(20種) 神經(jīng)酰胺(50種) ?;鈮A(38種) 兒茶酚胺(6種) | 氧化三甲胺(4種) 有機酸(12種) 脂溶性維生素(15種) 水溶性維生素(14種) 腸道菌群共代謝物(50種) 黃酮類(35種) 植物激素(6種) |
數(shù)據(jù)庫中包含6000+標準品自建庫以及人工整合高質(zhì)量公共庫,總計10萬+代謝物。通過標準品譜圖庫以及公共庫二級譜圖進行定性,有效控制假陽性率,鑒定物質(zhì)更準確。
不同的代謝物在正離子模式和負離子模式下可能產(chǎn)生不同的離子化效率和碎片模式,正負離子雙重掃描技術通過提供更全面的化學信息、增強靈敏度、快速極性切換和高分辨率質(zhì)譜分析,顯著增強了代謝物檢測的全面性,在檢測代謝組時結合使用兩種方式可以使代謝物覆蓋率更高,檢測效果也更好。
非靶代謝組學運用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進行樣本檢測,基于6000+標準品譜圖庫以及10萬+人工整合高質(zhì)量公共庫二級譜圖進行定性,鑒定到更多更準確的代謝物。平均定性數(shù)1800 +,最高可到3200+。 非靶脂質(zhì)組學運用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進行樣本檢測,基于超過170萬個脂質(zhì)分子及其預測碎片離子信息的脂質(zhì)組學數(shù)據(jù)庫進行匹配,實現(xiàn)系統(tǒng)地、可靠地脂質(zhì)定性分析。平均定性數(shù)1800 +,最高可到2600+。
發(fā)表期刊:Nature communications
影響因子:14.7
發(fā)表單位:清華大學藥學院
發(fā)表時間:2024.02.23
樣本類型 | 樣本來源 | 送樣量 | 最低送樣量 |
動物組織 | 常規(guī)組織(腦、心、肝、腎、肺、肌肉等柔軟組織) | 100mg | 50mg |
堅硬組織(軟骨、毛發(fā)) | 1g | 500mg | |
植物組織 | 柔軟組織(木本植物的葉、花等,草木植物,藻類,蕨類等植物 | 200mg | 100mg |
堅硬組織(根、樹皮、樹枝,果實種子等) | 10g | 5g | |
微生物 | 常見細菌、真菌菌體(菌體沉淀) | 200mg | 100mg |
細胞 | 懸浮/貼壁細胞(細胞計數(shù)/沉淀) | 1*10^7 | 5*10^6 |
液體類 | 血漿、血清、腦脊液、尿液、淚液 | 200uL | 50uL |
上清液 | 唾液、細胞上清液、發(fā)酵液、各種提取液 | 2mL | 1mL |
糞便 | 動物排泄物、腸道內(nèi)容物、未被消化吸收的食品殘渣 | 200mg | 50mg |
避免使用溶血樣本。
溶血會明顯改變血液中的代謝物水平。溶血和清亮血清相比,可引起至少43種代謝物水平明顯改變。其中苯丙氨酸、鳥氨酸、乙酸、檸檬酸、甲酸和琥珀酸等在溶血樣本中升高,而磷脂酰膽堿和鞘脂等脂類的濃度在溶血樣本中下降。
采集到的血清、血漿樣本顏色應該是淡黃色透明或者半透明液體,如果發(fā)現(xiàn)樣本中是紅色,說明在樣本采集過程中出現(xiàn)了溶血現(xiàn)象。
輕度溶血:<1%;中度溶血:1-3%,重度溶血大于3%。
已有研究報道,血清和血漿兩種樣本在代謝物檢出的種類上差異并不明顯,但是代謝物的濃度上存在差異。
雖然血清和血漿樣本的代謝譜存在一定的差異,但是早在2011年nature protocol就提出在代謝組血的研究中血漿和血漿樣本均可應用,研究者可根據(jù)自己的研究選擇合適的樣本類型,但在同意研究中所有樣本要保持一致。
建議:臨床樣本N≥30、動物樣本N≥10、細胞樣本 N≥8、植物樣本N ≥8、微生物樣本N≥8。
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